Leishmania infantum in the reproductive organs of dogs / Leishmania infantum em órgãos reprodutivos de cães

ABSTRACT: Leishmania infantum causes canine leishmaniasis. Using parasitological and molecular analyses, we identified L. infantum in the reproductive organs of male and female dogs. Using histochemistry, immunohistochemistry, and PCR, we examined tissue samples from the reproductive organs of 8 male dogs and 16 female dogs diagnosed with leishmaniasis. Despite the absence of macroscopic or microscopic lesions in these organs, we observed L. infantum amastigotes in tissue samples from the testis and the uterus. PCR and sequencing of these tissues revealed sequences that matched 100% with L. infantum DNA available at GenBank. The presence of L. infantum amastigotes and DNA in testicular and uterine tissue samples suggested that these organs can harbor the parasite without associated macroscopic or microscopic lesions, and this can be especially important in the vertical and venereal transmission of leishmaniasis in dogs.

RESUMO: Leishmania infantum é agente etiológico da leishmaniose canina. Por meio de análises parasitológicas e moleculares, a presença do parasita foi investigada em órgãos reprodutivos de cães machos e fêmeas. Amostras de tecidos dos órgãos reprodutivos de 8 cães machos e 16 fêmeas diagnosticados com leishmaniose foram avaliadas por histoquímica, imunohistoquímica e PCR. Apesar de não terem sido observadas lesões macroscópicas ou microscópicas nos órgãos reprodutivos desses cães, formas amastigotas de L. infantum foram observadas em amostras teciduais do testículo e útero. A PCR e o sequenciamento do DNA extraído desses tecidos revelaram sequências 100% idênticas a L. infantum depositadas no GenBank. Nossos resultados sugerem que os testículos e o útero podem abrigar o parasita, sem associação com lesões macroscópicas ou microscópicas, o que pode ter uma grande importância na transmissão venérea e vertical da leishmaniose entre cães.

Qualidade microbiológica e aceitabilidade de geleia mista funcional / Microbiological quality and acceptability of functional mixed jelly

O objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar a qualidade microbiológica e aceitabilidade de geleias mistas funcionais de manga “Tommy-Atkins” e maracujá (Passiflora edulis f. flavicarpa) enriquecidas com 0,5%, 1,0% e 3% de sementes de chia (Salvia hispânica). A caracterização sensorial utilizou os critérios: aparência, cor, aroma, consistência, sabor, doçura e impressão global. As características microbiológicas mantiveram-se dentro dos padrões estabelecidos pela legislação. A interpretação dos dados estatísticos da análise sensorial revelou que, para um nível de 5% de significância (p<0,05), o acréscimo de chia influenciou significativamente nos aspectos visuais. Porém, mesmo com adição das sementes o produto apresentou boa aceitação, indicando que a adição de chia é estratégica para o desenvolvimento deste alimento funcional.

Molecular detection of Leishmania infantum DNA according to clinical stages of leishmaniasis in dog / Deteção molecular de DNA de Leishmania infantum em diferentes estágios clínicos da leishmaniose em cães

Abstract The aim of this study was to compare molecular tests used to diagnose Leishmania spp. in dogs with different stages of infection. Blood and conjunctival swab (CS) samples from dogs classified in four clinical stages were subjected to different PCR protocols (13A/13B, MC1/MC2, LITSR/L5.8S and LEISH-1/LEISH-2 primers). To the study, 22.3% (48/215) of dogs were classified as without clinical signs, 67.5% (145/215) stage I (mild disease), 7.0% (15/215) stage II (moderate disease) and 3.2% (7/215) stage III (severe disease). The results showed that in blood samples, 13A/13B detected a significant higher number of positive dogs in stage I (25/145) and in total (42/215) (p≤0.05). However, when CS samples were tested, no difference was observed (p>0.05). On the other hand, in blood samples, MC1/MC2 detected significantly fewer positive dogs classified as without clinical signs (0/48), in stage I (0/145) and in total (1/215) (p≤0.05). Likewise, in CS samples, this primers showed also lower detection (1/215) (p≤0.05). So than, we can conclude that PCR on blood samples with 13A/13B primers has greater capacity to detect positive dogs, mainly at the initial of clinical disease than do other primers and MC1/MC2 are not a good choice to detect Leishmania infantum infection in dogs.

Resumo O objetivo deste estudo foi comparar testes moleculares usados para diagnosticar Leishmania spp., em cães apresentando diferentes estágios de infecção. Amostras de sangue e suabe conjuntival (SC) de cães classificados em quatro estágios clínicos foram submetidas a diferentes PCRs (primers 13A/13B, MC1/MC2, LITSR/L5.8S e LEISH-1/LEISH-2). Para o estudo, 22,3% (48/215) dos cães foram classificados como sem sinais clínicos, 67,5% (145/215) estágio I (doença leve), 7,0% (15/215) estágio II (doença moderada) e 3,2% (7/215) estágio III (doença grave). Os resultados mostraram que, em amostras de sangue, 13A/13B detectou número significativamente maior de cães positivos no estágio I (25/145) e no total (42/215) (p≤0,05). No entanto, quando as amostras de SC foram testadas, nenhuma diferença foi observada (p>0,05). Por outro lado, no sangue, MC1/MC2 detectou significativamente menos cães positivos sem sinais clínicos (0/48), em estágio I (0/145) e no total (1/215) (p≤0,05). Da mesma forma, em amostras de SC, MC1/MC2 também apresentou menor detecção (1/215) (p≤0,05). Assim, a PCR em amostras de sangue com 13A/13B tem maior capacidade de detectar cães positivos, principalmente no início da doença do que outros primers, e o par de primers MC1/MC2 não é uma boa escolha para detectar infecção por Leishmania infantum em cães.

Molecular detection of Leishmania spp. in cattle from Brazil by means of PCR using internal transcribed spacer 1 / Detecção molecular de Leishmania spp. em gado no Brasil por PCR com espaçador interno transcrito 1

Abstract Leishmania spp. are important agents of human and animal leishmaniases that have an important impact on public health. In this study, we aimed to detect the circulation of Leishmania spp. in cattle from a visceral leishmaniasis non-endemic area of the state of São Paulo, Brazil. DNA was extracted from blood samples from 100 heifers in the municipality of Pirassununga and was amplified using primers specific for the first internal transcriber spacer (ITS1), to assess the presence of trypanosomatids. The assays revealed that one sample presented bands of between 300 and 350 base pairs. In GenBank, this sample matched 100% with Leishmania infantum (314 base pairs). The results suggest that cattle can be infected by Leishmania infantum in Brazil.

Resumo Leishmania spp. são agentes causadores das leishmanioses em humanos e em animais, gerando grande impacto à saúde pública. Este estudo objetivou detectar a circulação de Leishmania spp. em área não endêmica para leishmaniose visceral de São Paulo, Brasil. Foram extraídas amostras de DNA de 100 novilhas da cidade de Pirassununga. Estas amostras foram amplificadas com os iniciadores específicos para tripanosomatídeos Internal Transcriber Spacer 1 (ITS1). Os ensaios revelaram uma amostra com bandas entre 300 e 350 pares de base (pb). A amostra demonstrou 100% de identidade com Leishmania infantum (314 pb). Os resultados sugerem que o gado pode ser infectado por L. infantum no Brasil.

Detection of avian metapneumovirus subtype A from wild birds in the State of São Paulo, Brazil / Detecção de metapneumovirus aviário subtipo A em aves silvestres no estado de São Paulo, Brasil

The present study investigated the circulation of avian metapneumovirus (aMPV) in wild birds in Brazil. To do so, 131 samples from 366 oropharyngeal or cloacal swabs collected from 18 species of birds were tested individually or in pools by RT-PCR. Samples detected by RT-PCR were selected for DNA sequencing. Thirteen (9.9%) samples were detected by the RT-PCR targeting the N gene and four out of 13 samples were sequenced. Sequencing results showed a high identity with the aMPV subtype A. Our results confirm the circulation of the aMPV subtype A in wild birds in Brazil even five years after its last detection.(AU)

O presente estudo investigou a circulação de metapneumovírus aviário em aves silvestres no Brasil. Para tanto, 131 amostras de 366 suabes orofaringeanos ou cloacais coletados de 18 espécies de aves foram testadas individualmente ou na forma de pools por RT-PCR. As amostras detectadas por RT-PCR foram selecionadas para sequenciamento. Treze (9,9%) das amostras foram detectadas por RT-PCR tendo o gene N como alvo; destas, quatro foram sequenciadas com sucesso. Resultados do sequenciamento mostraram alta identidade com o aMPV de subtipo A. Nossos resultados confirmam a circulação de aMPV subtipo A em aves silvestres no Brasil mesmo cinco anos após sua última detecção.(AU)

Prática de atividade física no lazer entre idosos nas capitais brasileiras e no Distrito Federal: 2009 a 2017 / Practice of leisure physical activity among elderly people in the Brazilian capitals and Federal District: 2009 to 2017

Introdução: O aumento da importância das doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) no perfil de saúde da população acarretou em demanda pela vigilância de seus fatores de risco e proteção. A população idosa vem experienciando uma grande expansão nas últimas décadas e sua vulnerabilidade majorada para as DCNT a classifica como alvo prioritário para essa vigilância. Objetivo: Analisar a tendência temporal da prática de atividade física no lazer entre a população idosa nas capitais brasileiras e no Distrito Federal, entre 2009 e 2017. Métodos: Dados do Vigitel coletados entre 2009 e 2017 (n= 129.967 idosos) (≥60 anos) foram utilizados. Informações acerca da intensidade, frequência semanal (dias/semana) e duração habitual (minutos/episódio) da prática de atividade física de lazer foram utilizados para a identificação do percentual de idosos, atendendo às recomendações atuais de prática (≥150min/semana). Essas informações foram estimadas para cada ano, para o conjunto completo da população e segundo estratos sociodemográficos e de saúde. Modelos de regressão Prais-Winsten foram usados para a análise da variação temporal. Resultados: A porcentagem dos idosos que referiu prática de atividade física nos 90 dias que antecederam a entrevista aumentou de 37,2% para 43,0% no período entre 2009 e 2017 (0,70 pontos percentuais (pp)/ano). A maioria dos idosos que já praticava atividade física relatou como opção atividade de intensidade moderada (93,9% em 2017). A porcentagem de idosos referindo não praticar atividade física ao menos um dia por semana diminuiu (de 64,2% para 59,4%, -0,73 pp/ano), com aumento nas faixas de prática entre 1 e 4 dias/semana. A duração habitual (minutos/episódio) da prática também aumentou, de 48,1% para 58,2% (0,62pp/ano), com a porcentagem de prática em 60 minutos ou mais por episódio. Com isso, a porcentagem de idosos atingindo nível recomendado de prática (≥150min/semana) aumentou de 23,2% para 25,8% (0,30 pp/ano), com maiores aumentos observados naqueles com idade entre 60 a 69 anos (0,39pp/ano), com escolaridade entre 0 e 8 anos de estudo (0,22pp/ano) e residentes nas capitais da região Norte (0,99pp/ano). De forma geral, maiores aumentos foram observados nos estratos com menor nível de prática no início do período estudado. Conclusão: A prática de atividade física evoluiu de forma favorável, com aumento da porcentagem de idosos atendendo às recomendações de prática.(AU)

Introduction: The increased importance of noncommunicable chronic diseases (NCDs) in the health profile of the population led to a demand for the surveillance of their risk factors and protection. The elderly population has been experiencing great expansion in recent decades and their increased vulnerability to NCDs classifies it as a priority target for this surveillance. Objective: To analyze the temporal tendency of leisure time physical activity among the elderly population in the Brazilian capitals and Federal District between 2009 and 2017. Methods: Vigitel data collected between 2009 and 2017 (n=129,967 elderly) (≥60 years) were used. Information related to the intensity, weekly frequency (days/week) and habitual duration (minutes/episode) of leisure physical activity practice were used to identify the percentage of elderly attending to the current recommendations of the practice (≥150min/week). This information was estimated for each year, for the entire population and according to socio-demographic and health strata. Prais-Winsten regression were used for temporal variation analysis. Results: The percentage of the elderly referring the physical activity practice in the 90 days before the interview increased from 37.2% to 43.0% in the period between 2009 and 2017 (0,70 percentage points (pp)/year). The majority of the elderly opted for moderate intensity activity (93.9% in 2017). The percentage of elderly individuals who reported not practicing physical activity at least one day per week decreased (from 64.2% to 59.4%, -0.73pp/year), with an increase in the practice ranges between 1 and 4 days/week. The usual duration of the practice also increased, with the percentage of practice in 60 minutes or more per episode, increasing from 48.1% to 58.2% (0.62pp/year). As a result, the percentage of elderly people reaching the recommended volume of leisure physical activity practice increased from 23.2% to 25.8% (0.30pp/year) with higher increases observed in those aged 60-69 years (0.39pp / year), with education between 0 and 8 years of study (0.22pp/year) and residents in the capitals of the North region (0.99pp /year).. In general, higher increases were observed in strata with lower level of practice at the beginning of the studied period. Conclusion: The practice of physical activity evolved favorably, with an increase in the percentage of elderly attending to the practice recommendations.(AU)

Molecular and serological detection of Leishmania spp. in horses from an endemic area for canine visceral leishmaniasis in southeastern Brazil / Detecção molecular e sorológica de infecção por Leishmania (Leishmania) infantum em cavalos na região Sudeste do Brasil

This study aimed to verify the occurrence of Leishmania spp. and Leishmania (Leishmania) infantum in horses from a visceral leishmaniasis endemic area in Brazil. DNA samples from blood and conjunctival swab (CS) were tested by PCR and Indirect Immunofluorescence Antibody Test (IFAT). Although none of the horses was clinically sick, animals infected by Leishmania spp. were found and some could be characterized as infected by L. (L.) infantum. From 40 horses, 100% of the animals were positive by blood PCR, 90% (36/40) by CS PCR, and 2.5% (01/40) in serodiagnosis, by IFAT. Six from these 40 horses were L. (L.) infantum positive by blood PCR. Direct sequencing and analysis of amplicons resulted in a sequence to evolutionary analysis. Results indicate the presence of Leishmania spp. and L. (L.) infantum infecting healthy horses in Brazil. The presence of Leishmania spp. and L. (L.) infantum DNA in asymptomatic horses suggests that they can be important reservoirs of these parasites, a highly relevant finding for the epidemiological surveillance of the diseases they cause.(AU)

O estudo objetivou verificar a ocorrência de Leishmania spp. e Leishmania (Leishmania) infantum em cavalos de uma região endêmica para leishmaniose visceral do Brasil. Amostras de DNA de sangue e suabe conjuntival (SC) foram testadas pela PCR e pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Embora nenhum cavalo estivesse clinicamente doente, animais infectados por Leishmania spp. e L. (L.) infantum foram encontrados em Ilha Solteira/SP. Dos 40 cavalos, 100% (40/40) foram positivos pela PCR de sangue, 90% (36/40) pela PCR de SC, e 2,5% (01/40) no sorodiagnóstico, pela RIFI. Seis desses 40 cavalos foram positivos para L. (L.) infantum pela PCR de sangue. O sequenciamento direto e a análise dos amplicons resultaram em uma sequência para análise evolutiva. Os resultados indicam a presença de Leishmania spp. e L. (L.) infantum infectando cavalos saudáveis no Brasil. A presença de DNA de Leishmania spp. and L. (L.) infantum em cavalos saudáveis sugere que eles podem ser importantes reservatórios desses parasitas, um achado altamente relevante para a vigilância epidemiológica das doenças que causam.(AU)

Microcefalia no Brasil: prevalência e caracterização dos casos a partir do Sistema de Informações sobre Nascidos Vivos (Sinasc), 2000-2015 / Microcephaly in Brazil: prevalence and characterization of cases from the Information System on Live Births (Sinasc), 2000-2015 / Microcefalia en Brasil: prevalencia y caracterización de casos a partir del Sistema de Informaciones sobre Nacidos Vivos (Sinasc), 2000-2015

OBJETIVO: descrever os coeficientes de prevalência e caracterizar os casos de microcefalia ao nascer no Brasil, no período 2000-2015. MÉTODOS: estudo descritivo com dados do Sistema de Informações sobre Nascidos Vivos (Sinasc). Foram calculados coeficientes segundo regiões e características das mães e nascidos vivos (NV). RESULTADOS: a média anual de casos de microcefalia foi 164 no período 2000-2014, enquanto em 2015 foram registrados 1.608 casos (54,6 casos por 100 mil NV). Coeficientes mais elevados foram observados entre prematuros (81,7; IC95%72,3; 92,2), nascidos de mães pretas (70,9; IC95%58,5; 85,9) ou pardas (71,5; IC95%67,4; 75,8), com idades ≤19 (70,3; IC95%63,5; 77,8) ou ≥40 anos (62,1; IC95%46,6; 82,6), ≤3 anos de estudo (73,4; IC95%58,2; 92,4) e residentes na região Nordeste (138,7; IC95%130,9; 147,0). CONCLUSÃO: o elevado número de casos de microcefalia registrado em 2015 reforça a importância do Sinasc e do aprimoramento do sistema de vigilância das anomalias congênitas.

OBJECTIVE: to describe the prevalence coefficients and characterize cases of microcephaly at birth in Brazil from 2000-2015. METHODS: this is a descriptive study with data from the Information System on Live Births (Sinasc). The coefficients were calculated by region and characteristics of mothers and live births (LB). RESULTS: the annual average number of microcephaly cases was 164 for the period 2000-2014, whilst in 2015, 1,608 cases were registered (54.6 cases per 100 thousand LB). Higher coefficients were observed among preterm babies (81.7; 95%CI 72.3;92.2), born from black-skinned (70.9; 95%CI 58.5;85.9) or to brown-skinned (71.5; 95%CI67.4;75.8) women, to women aged ≤19 (70.3; 95%CI 63.5;77.8) or ≥40 (62.1; 95%CI 46.6;82.6), with ≤3 years of study (73.4; 95%CI 58.2;92.4) and residents in the Northeast region (138.7; 95%CI 130.9;147.0). CONCLUSION: the high number of microcephaly cases in 2015 reinforces the importance of Sinasc and the need to improve the surveillance of congenital anomalies.

OBJETIVO: describir coeficientes de prevalencia y caracterizar casos de microcefalia al nacer en Brasil, en el periodo 2000-2015. MÉTODOS: estudio descriptivo con datos del Sistema de Informaciones sobre Nacidos Vivos (Sinasc). Los coeficientes fueron calculados según regiones, características maternas y del nacido vivo (NV). RESULTADOS: el promedio anual de casos de microcefalia fue 164 en el periodo 2000-2014, mientras en 2015 fue 1.608 (54,6 casos por 100.000 NV). Coeficientes más elevados fueron observados entre prematuros (81,7; IC95% 72,3-92,2), nacidos de madres negras (70,9; IC95% 58,5-85,9) o pardas (71,5; IC95% 67,4-75,8), con edades ≤19 (70,3; IC95% 63,5-77,8) o ≥40 años (62,1; IC95% 46,6-82,6), ≤3 años de estudio (73,4; IC95% 58,2-92,4), y residentes del Noreste (138,7; IC95% 130,9-147,0). CONCLUSIÓN: el elevado número de casos de microcefalia, en 2015, refuerza la importancia del Sinasc y necesidad de mejorías del sistema de vigilancia de anomalías congénitas.

Evidence of heterozygosity and recombinant alleles in single cysts of Giardia duodenalis / Evidência de heterozigose e alelos recombinantes em cistos individualizados de Giardia duodenalis

Abstract Giardia duodenalis is divided into eight assemblages (named A to H). Isolates of assemblage A are divided into four sub-assemblages (AI, AII, AIII and AIV). While isolates of sub-assemblage AII are almost exclusively detected in human hosts, isolates of assemblage B are encountered in a multitude of animal hosts and humans. Here, we isolated single cysts of G. duodenalis from a human stool sample and found that one of them had overlaps of assemblage AII and B alleles and an unexpectedly high number of variants of the beta-giardin (Bg) and GLORF-C4 (OrfC4) alleles. In addition, one of the Bg alleles of that cyst had a fragment of sub-assemblage AII interspersed with fragments of assemblage B, thus indicating that this allele may be a recombinant between sequences A and B. Our results are unprecedented and put a check on the statement that different assemblages of G. duodenalis represent species with different host specificities.

Resumo A espécie Giardia duodenalis é dividida em oito grupos (nomeados de A a H). Isolados do grupo A são divididos em quatro subgrupos (AI, AII, AIII and AIV). Enquanto isolados do subgrupo AII são detectados quase exclusivamente em hospedeiros humanos, isolados do subgrupo B são encontrados em uma grande variedade de hospedeiros entre animais e humanos. Neste trabalho, foi constatado que, dentre diversos cistos individualizados de G. duodenalis provenientes de fezes de origem humana, um cisto continha os alelos AII e B e um número inesperado de variantes de alelos codificadores de beta giardina e GLORF-C4. Ainda, um dos alelos beta giardina desse cisto possuía fragmentos AII intercalando um fragmento B, indicando que esse alelo pode ser um recombinante entre alelos AII e B. Os resultados aqui apresentados são inéditos e colocam em dúvida o conceito atual de que os diferentes grupos de G. duodenalis representam espécies distintas com diferentes graus de especificidade por hospedeiros.

Molecular phylogeny of Toxoplasmatinae: comparison between inferences based on mitochondrial and apicoplast genetic sequences / Filogenia molecular de Toxoplasmatinae: comparação entre inferências baseadas em sequências genéticas mitocondriais e de apicoplasto

Abstract Phylogenies within Toxoplasmatinae have been widely investigated with different molecular markers. Here, we studied molecular phylogenies of the Toxoplasmatinae subfamily based on apicoplast and mitochondrial genes. Partial sequences of apicoplast genes coding for caseinolytic protease (clpC) and beta subunit of RNA polymerase (rpoB), and mitochondrial gene coding for cytochrome B (cytB) were analyzed. Laboratory-adapted strains of the closely related parasites Sarcocystis falcatula and Sarcocystis neurona were investigated, along with Neospora caninum, Neospora hughesi, Toxoplasma gondii (strains RH, CTG and PTG), Besnoitia akodoni, Hammondia hammondiand two genetically divergent lineages of Hammondia heydorni. The molecular analysis based on organellar genes did not clearly differentiate between N. caninum and N. hughesi, but the two lineages of H. heydorni were confirmed. Slight differences between the strains of S. falcatula and S. neurona were encountered in all markers. In conclusion, congruent phylogenies were inferred from the three different genes and they might be used for screening undescribed sarcocystid parasites in order to ascertain their phylogenetic relationships with organisms of the family Sarcocystidae. The evolutionary studies based on organelar genes confirm that the genusHammondia is paraphyletic. The primers used for amplification of clpC and rpoB were able to amplify genetic sequences of organisms of the genus Sarcocystisand organisms of the subfamily Toxoplasmatinae as well.

Resumo A filogenia da subfamília Toxoplasmatinae tem sido amplamente investigada com diversos marcadores moleculares. Neste estudo, a filogenia molecular da subfamília Toxoplasmatinae foi analisada através de genes de apicoplasto e mitocondriais. Foram analisadas sequências parciais de genes de apicoplasto codificadores da protease caseinolítica (clpC), e da subunidade beta da RNA polimerase (rpoB) e de gene mitocondrial codificador de citocromo B (cytB). Foram investigadas cepas adaptadas em laboratório de Sarcocystis neurona eSarcocystis falcatula, parasitos estreitamente relacionados, além de Neospora caninum, Neospora hughesi, Toxoplasma gondii (cepas RH, CTG e PTG),Besnoitia akodoni, Hammondia hammondi e duas linhagens geneticamente divergentes de Hammondia heydorni. A análise molecular, baseada em genes de organelas, não diferenciou claramenteN. caninum de N. hughesi, porém foi possível confirmar as duas linhagens de H. heydorni. Foram encontradas pequenas diferenças entre as cepas adaptadas em laboratório deS. falcatula e S. neurona em todos os marcadores moleculares avaliados. Concluindo, filogenias congruentes foram reconstruídas com os três diferentes genes que podem ser úteis em triagem de parasitos sarcocistídeos não identificados, para identificar sua relação com organismos da família Sarcocystidae. Os estudos evolutivos com genes organelares confirmam que o gênero Hammondia é parafilético. Osprimers utilizados para amplificação declpC e rpoB foram capazes de amplificar sequências genéticas de organismos do gênero Sarcocystis e da subfamília Toxoplasmatinae.

Monitoramento de parâmetros laboratoriais em gatos sem raça definida durante o período neonatal / Monitoring of laboratory parameters during neonatal period in mixed-bred cats

O objetivo do presente estudo foi à monitoração dos parâmetros laboratoriais como hemograma, enzimas hepáticas alanina aminotransferase (ALT) e gama-glutamiltransferase (GGT), glicemia e proteinograma sérico, e avaliar o efeito da idade em gatos sem raça definida durante a fase neonatal. Vinte gatos machos e fêmeas foram utilizados a partir do terceiro dia de vida até o 38º dia de idade. As amostras de sangue foram colhidas semanalmente e as análises laboratoriais (hemograma, enzimas hepáticas, glicemia e proteinograma sérico) realizadas no 3º, 10º, 17º, 24º, 31º e 38º dia de idade. Os resultados exibiram efeito significativo da idade sobre a contagem total de eritrócitos, concentração de hemoglobina, volume globular, volume corpuscular médio, concentração de hemoglobina corpuscular média, leucócitos totais, neutrófilos, eosinófilos e basófilos. Nenhum efeito foi observado em células como linfócitos, monócitos ou na concentração sérica de glicose. A análise das modificações ocorridas nos parâmetros laboratoriais durante a fase neonatal reflete o desenvolvimento fisiológico do filhote e contribui para o conhecimento do processo adaptativo em gatos neonatos durante o primeiro mês de vida, sendo útil para a avaliação clínica, diagnóstico e tratamento das doenças neonatais.(AU)

The purpose of the study was to evaluate the effects of age on blood count, liver enzymes alanine aminotransferase (ALT) and gamma-glutamyltransferase (GGT), glycemia and on protein profile in mixed-breed cats during the neonatal phase. Twenty male and female cats were used from 3 to 38 days after birth. Weekly blood samples were obtained and laboratory analyses (blood count, liver enzymes, glycemia and protein profile) were performed on the 3rd, 10th, 17th, 24th, 31st and 38th day of age. The results exhibited significant effect of age on total red blood cell count, hemoglobin concentration, packed cell volume, mean cell volume, mean cell hemoglobin concentration, total leukocyte count, mean segmented neutrophils, eosinophils and basophils. No effect was observed in lymphocyte, monocyte and glucose concentration. The analysis of changes in laboratory parameters which occurred during the neonatal period reflects the physiological development of the kitten and contributes to knowledge of the adaptive process in neonates cats during the first month of life, and is useful for clinical assessment, diagnosis and treatment of neonatal diseases.(AU)

Brazilian avian metapneumovirus subtypes A and B: experimental infection of broilers and evaluation of vaccine efficacy / Metapneumovirus aviário subtipos A e B brasileiros: infecção experimental em frangos de corte e eficácia vacinal

Avian metapneumovirus (aMPV) is a respiratory pathogen associated with the swollen head syndrome (SHS) in chickens. In Brazil, live aMPV vaccines are currently used, but subtypes A and, mainly subtype B (aMPV/A and aMPV/B) are still circulating. This study was conducted to characterize two Brazilian aMPV isolates (A and B subtypes) of chicken origin. A challenge trial to explore the replication ability of the Brazilian subtypes A and B in chickens was performed. Subsequently, virological protection provided from an aMPV/B vaccine against the same isolates was analyzed. Upon challenge experiment, it was shown by virus isolation and real time PCR that aMPV/B could be detected longer and in higher amounts than aMPV/A. For the protection study, 18 one-day-old chicks were vaccinated and challenged at 21 days of age. Using virus isolation and real time PCR, no aMPV/A was detected in the vaccinated chickens, whereas one vaccinated chicken challenged with the aMPV/B isolate was positive. The results showed that aMPV/B vaccine provided a complete heterologous virological protection, although homologous protection was not complete in one chicken. Although only one aMPV/B positive chicken was detected after homologous vaccination, replication in vaccinated animals might allow the emergence of escape mutants.

O Metapneumovírus aviário (aMPV) é um patógeno respiratório associado à síndrome da cabeça inchada (SHS) em galinhas. Apesar de vacinas vivas contra o aMPV serem utilizadas no Brasil, os subtipos A e B (aMPV/A e aMPV/B) são ainda encontrados no país, com predominância do subtipo B. Este estudo foi conduzido com o intuito de estudar dois isolados brasileiros de aMPV (subtipos A e B) isolados de frango. Para isto, um desafio experimental em frangos foi conduzido com o intuito de explorar a capacidade de replicação dos subtipos A e B Brasileiros. Posteriormente, a protecção virológica conferida por uma vacina do subtipo B em pintos foi realizada com os mesmos isolados. Após o desafio experimental demonstrou-se, por isolamento viral e PCR em tempo real, que o isolado do subtipo B replicou por maior período de tempo e em quantidades maiores, em comparação com o subtipo A. Para o estudo de proteção, 18 pintos de um dia de idade foram vacinados e desafiados aos 21 dias. Usando isolamento viral e PCR em tempo real, em nenhuma ave vacinada e desafiada com aMPV/A foi detectado o vírus, ao passo que uma ave vacinada e desafiada com o aMPV/B foi positiva. Os resultados mostraram que a vacina do subtipo B forneceu protecção heteróloga completa, embora a protecção homóloga não tenha sido conferida em uma ave. Apesar de o aMPV/B ter sido detectado em apenas um frango após vacinação homóloga, a replicação viral em aves vacinadas pode resultar em emergência de mutantes de escape.

Educação em saúde como estratégia de promoção de saúde bucal em gestantes / Health education as a strategy for the promotion of oral health in the pregnancy period

O objetivo desta revisão da literatura é discutir a importância da educação em saúde como estratégia de promoção de saúde bucal no período gestacional. Foram estudadas as manifestações bucais mais comuns na gestação, concluindo-se que, embora a gestação por si só não seja responsável por tais manifestações como, por exemplo, a cárie dentária e a doença periodontal, faz-se necessário o acompanhamento odontológico no pré-natal, considerando-se que as alterações hormonais da gravidez poderão agravar as afecções já instaladas. Destacou-se na promoção de saúde bucal na gestante a educação em saúde bucal, considerando-a parte importante do Programa de Atenção à Saúde da Mulher, conforme recomendado pelas atuais Diretrizes da Política Nacional de Saúde Bucal. Considera-se que, por meio de ações de educação em saúde bucal, desenvolvidas no pré-natal por uma equipe multiprofissional, orientada por um cirurgião-dentista, a mulher poderá se conscientizar da importância de seu papel na aquisição e manutenção de hábitos positivos de saúde bucal no meio familiar e atuar como agente multiplicador de informações preventivas e de promoção de saúde bucal.

This literature revision is intended to discuss the importance of health education as a strategy to oral health promotion in the pregnancy period. The most common mouth manifestations during pregnancy have been studied, and the conclusion is that, although pregnancy itself is not responsible for such manifestations in the mouth, e.g. dental decay and periodontal diseases, a dentistry follow-up during prenatal care is necessary, considering that hormonal alterations in pregnancy may aggravate the diseases contracted. The oral health promotion for pregnant women has been focused on mouth health education, considering it an important part of the Program of Attention to Women's Health, as recommended by the current National Politics' Mouth Health Policy. It is considered that, by means of mouth health education activities, implemented during prenatal care by a multiprofessional team, under an oral surgeon, women may be aware of the importance of their role in the attainment and maintenance of positive mouth health habits in family environment and act as an agent to multiply preventive and mouth-health-promotion information.

Comparative evaluation of conventional RT-PCR and real-time RT-PCR (RRT-PCR) for detection of avian metapneumovirus subtype A / Comparação entre as técnicas de RT-PCR convencional e RT-PCR em tempo real para a detecção do metapneumovírus aviários subtipo A

Avian metapneumovirus (AMPV) belongs to Metapneumovirus genus of Paramyxoviridae family. Virus isolation, serology, and detection of genomic RNA are used as diagnostic methods for AMPV. The aim of the present study was to compare the detection of six subgroup A AMPV isolates (AMPV/A) viral RNA by using different conventional and real time RT-PCR methods. Two new RT-PCR tests and two real time RT-PCR tests, both detecting fusion (F) gene and nucleocapsid (N) gene were compared with an established test for the attachment (G) gene. All the RT-PCR tested assays were able to detect the AMPV/A. The lower detection limits were observed using the N-, F- based RRT-PCR and F-based conventional RT-PCR (10(0.3) to 10Õ TCID50 mL-1). The present study suggests that the conventional F-based RT-PCR presented similar detection limit when compared to N- and F-based RRT-PCR and they can be successfully used for AMPV/A detection.

O metapneumovírus aviário (AMPV) pertence ao gênero Metapneumovirus, família Paramyxoviridae. Isolamento viral, sorologia e detecção do RNA genômico são atualmente as técnicas utilizadas para o diagnóstico desse agente. O objetivo do presente estudo foi comparar a detecção de RNA viral de seis isolados de AMPV, subtipo A (AMPV/A), utilizando diferentes métodos de RT-PCR convencional e real time RT-PCR (RRT-PCR). Duas novas técnicas de RT-PCR convencional e duas técnicas de RRT-PCR, ambas para a detecção dos genes da nucleoproteína (N) e da proteína de fusão (F), foram comparadas com um RT-PCR previamente estabelecido para a detecção do AMPV (gene da glicoproteína -G). Todos esses métodos foram capazes de detectar os isolados AMPV/A. As técnicas RRT-PCR (genes F e N) mostraram os menores limites de detecção (10(0.3) to 10Õ TCID50 mL-1). Os resultados sugerem que as técnicas RT-PCR convencional (gene F) e as técnicas de RRT-PCR (gene F e N) desenvolvidas no presente estudo podem ser utilizadas com sucesso para a detecção do AMPV/A. Além disso, o RRT-PCR gera resultados rápidos e sensíveis, o que o torna uma ferramenta alternativa para o isolamento viral.

Substituted phenols as pollutants that affect membrane fluidity.

In a toxicological context, the cellular effects of a variety of molecular compounds interacting with membranes may be understood in terms of their ability to affect and modulate lipid-membrane physical properties and even slight changes in membrane fluidity may cause aberrant function and pathological processes. Different model systems (mice splenocytes and liposomes) have been used in modelling studies of the physical effects on lipid bilayers underlying the action of membrane active phenolic compounds, considered by EPA (Environmental Protection Agency) as priority pollutants (phenol; 2-chlorophenol; 2,4-dichlorophenol; 2,4,6-trichlorophenol; pentachlorophenol; 2-nitrophenol; 2,4-dinitrophenol; 2-methyl-4,6-dinitrophenol). Membrane fluidity was assessed by fluorescence steady-state anisotropy of a fluorescent probe 1,6-diphenil-1,3,5-hexatriene (DPH). The substituted phenols increased the fluidity of cells and liposome membranes in a concentration dependent manner and the nitro substituted phenols were the most efficient perturbing the biophysical properties of the membrane. A good parallelism has been established between the results obtained with cell models and artificial liposome model systems, implying that liposomes are useful alternative systems in membrane modification studies and can be conveniently used in order to evaluate the potential toxic effect of phenol derivatives that are common environmental pollutants.

Evaluation of sampling methods for periphytic fauna in macrophytes at the Espinhaço Mountain Range Biosphere Reserve, Minas Gerais State, Brazil - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.377 / Avaliação dos métodos de amostragem para fauna perifítica em macrófitas na Reserva da Biosfera, Serra do Espinhaço, Estado de Minas Gerais, Brasil - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.377

The methods Jar, Manual Removal and modified Ekman`s Dredge were evaluated for sampling periphyton fauna associated to aquatic macrophytes. Sixty three samples were collected from five lentic and three lotic water bodies at Espinhaço Mountain Range Biosphere Reserve (Minas Gerais, Brazil). ANOVA and Tukey statistical tests were performed for Protista, Rotifera and Crustacea richness, whilst Protista, Rotifera, Crustacea, Gastrotricha, Tardigrada and Nematoda, abundance were evaluate by percentage. Amongst the three methods, Dregde is less indicated for different water bodies systems when there is interested in analyzing various microinvertebrate groups. The Protista and Rotifera are both 80% of the total invertebrate community abundance and richness. In evaluated ecosystems, for Protista analysis all methods are relevant; on the other hand, Crustacea analysis demands Jar methods. The Manual Removal and Dregde methods are appropriated to Rotifera analysis. The abundance of Gastrotricha and Tardigrada demonstrated better results for Jar method, and Nematoda for Dregde method. The three methods are appropriated for periphytic fauna sampling in both water body systems, nevertheless is important to be aware that for each fauna community in a specified ecosystem there is a specific method for best performance.

Os métodos Jarra, Remocao Manual e Draga de Eckman modificada foram avaliados para amostrar a fauna perifitica associada a macrofitas aquaticas. Foram coletadas 63 amostras em cinco ambientes lenticos e tres loticos na reserva da biosfera da Serra do Espinhaco (Estado de Minas Gerais, Brasil). Os testes estatisticos Anova e Tukey foram feitos para riqueza de Protista, Rotifera e Crustacea, enquanto para a abundancia de Protista, Rotifera, Crustacea, Gastrotricha, Tardigrada e Nematoda foram avaliados os percentuais. Os protozoarios e rotiferos representaram 80% da abundancia e riqueza da comunidade. Nos ecossistemas avaliados todos os metodos foram relevantes para Protista, por outro lado, o metodo da Jarra foi o mais adequado para a analise de Crustacea. Entre os metodos, a Draga foi menos indicada para os grupos de microinvertebrados nos ecossistemas aquaticos. Os metodos Remocao Manual e Draga foram apropriados para analisar Rotifera. A abundancia de Gastrotricha e Tardigrada demonstrou melhores resultados pelo metodo da Jarra e Nematoda pelo metodo da Draga. Os tres metodos sao apropriados para amostragem da fauna perifitica em ambos os sistemas aquaticos. Entretanto, e importante estar ciente de que para cada tipo de ecossistema a amostragem da comunidade faunistica requer um metodo especifico para obter a melhor performance.

Rabies neutralizing antibody detection by indirect immunperoxidase serum neutralization assay performed on chicken embryo related cell line

The aim of this study was to evaluate the indirect immunoperoxidase virus neutralization (IPVN) and mouse neutralization test (MNT) to detect antibodies against rabies virus from vaccinated dogs and cattle. The IPVN was set up for the ability to measure 0.5 International Units/ml (IU) of antibody required by the World Health Organization and the Office International des Epizooties as the minimum response for proof of rabies immunization. IPVN was developed and standardized in chicken embryo related (CER) cell line when 141 dog and 110 cattle sera were applied by serial five-fold dilutions (1:5, 1:25, 1:125) as well as the positive and negative reference controls, all added in four adjacent wells, of 96-well microplates. A 50 æl amount of CVS32 strain dilution containing 50-200 TCID50/ml was mixed to each serum dilution, and after 90 min 50 æl of 3 x 10(5) cells/mlcell suspension added to each well. After five days of incubation, the monolayers were fixed and the IPVN test performed. The correlation coefficient between the MNT and IPVN performed in CER cells was r = 0.9949 for dog sera (n = 100) and r = 0.9307 for cattle sera (n = 99), as well as good specificity (94.7 percent), sensitivity (87.5 percent), and agreement (96.6 percent) were also obtained. IPVN technique can adequately identify vaccinated and unvaccinated animals, even from low-responding vaccinated animals, with the advantage of low cost and faster then MNT standard test.

Timoma em cäo. Relato de caso / Thymoma in the dog. Case report

Uma cadela, Dachshund, quatro anos, foi encaminhada ao H.V. da FMVZ-UNESP-Botucatu-SP com histórico de prostraçäo, emagrecimento progressivo, anorexia, cansaço e tosse seca. Ao exame clínico observou-se apatia, secreçäo nasal serosa bilateral e dispnéia intensa. Radiografia torácica demonstrou efusäo pleural, edema pulmonar acentuado, desvio dorsal da traquéia e possível massa mediastinal. A ultra-sonografia, após drenagem torácica, confirmou a presença de massa mediastinal, sendo classificada como neoplasia maligna de origem epitelial pela citologia aspirativa por agulha fina. O animal veio a óbito logo após o diagnóstico de neoplasia. A necropsia constatou-se massa mediastinal encapsulada, consistência macia e superfície de corte com coloraçäo branco-acinzentada e áreas necrótico-hemorrágicas, localizada na regiao ântero-ventral do tórax. O exame histopatológico demonstrou células epiteliais neoplásicas, células linfóides (timócitos) com morfologia normal, vasos sangüíneos de pequeno e médio calibre, formaçöes císticas com conteúdo eosinofílico e corpúsculos de Hassall. A imunohistoquímica apresentou positividade para citoqueratina AE1/AE3 e UCHL, confirmando o diagnóstico de timoma

Avaliaçäo do teor de flúor na água de abastecimento público do município de Vitória-ES / Evaluation of the fluoride concentration in the drinking water of the city of Vitória-ES

O teor de flúor considerado ótimo para o município de Vitória-ES, em 1982, foi de 0,7 ppm. Com a fluoretaçäo da água de abastecimento público, ocorreu uma reduçäo no CPOD, entretanto, foi observado uma prevalência alta de fluorose. Com base nisso, foi colhida água dos bebedouros de 14 escolas situadas na 7 microregiöes da cidade, em duas oportunidades diferentes, para medida do teor de flúor. Os resultados mostraram um nível médio de flúor igual a 0,40 ppm na água coletada das torneiras no dia 22 de abril e 0,42 ppm no dia 21 de maio. A variaçäo no teor de flúor das escolas foi grande - de 0,25 a 0,65 ppm. Considerando-se as mudanças térmicas dos últimos anos e o grau de fluorose apresentado pelas crianças, um estudo sobre o teor de flúor ideal para as situaçöes atuais faz-se necessário

Variaçöes na interpretaçäo das intruçöes sobre prescriçöes / Variation in the interpretation of prescription instructions

Mil e oitenta pacientes interpretaram as intruçöes de um grupo de seis prescriçöes comuns, selecionadas na Farmácia-Escola da Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho" de Araraquara. Näo houve uniformidade de interpretaçöes entre os pacientes. Dos entrevistados, 20,6% (1,7 a 74,1%) interpretaram erroneamente as prescriçöes escritas. Essas observaçöes ilustram e reforçam a necessidade de cooperaçäo entre os profissionais - farmacêutico e prescritor